2006年,日本京都大学Yamanaka (山中伸弥)教授所率领的研究小组筛选出了4 个在胚胎干细胞或肿瘤细胞中高表达的基因转录因子(Oct4/Sox2/Klf4/c-Myc,OSKM),并利用逆转录病毒载体将这些因子转染到小鼠成纤维细胞中。通过这些因子在受体细胞内过量表达,诱导成纤维细胞去分化,使成体细胞重编程为多能干细胞,并将其定义为诱导多能干细胞 (Induced pluripotent stem cells,iPS)[1]。iPS 细胞的主要特征表现为:能够形成ES 细胞样的集落,胞核较大核质比高,碱性磷酸酶 (AP) 染色呈阳性,表达内源性Oct4、Sox2 和Nanog,端粒酶活性提高,能在裸鼠体内形成畸胎瘤等。
iPSC建系流程

iPSC克隆挑取示意图
iPSC细胞形态
iPSC细胞表面标志物鉴定

细胞干性检测:碱性磷酸酶染色
iPSC可表达组织非特异性磷酸酯酶,因此,我们使用Blue-ColorTM AP Staining Kit碱性磷酸酯酶显色试剂盒鉴定诱导多功能干细胞iPSC。
核型分析检测
核型分析是将待测细胞的染色体按照人类细胞固有的染色体形态特征和规定,进行配对、编号和分组,并进行形态分析的过程。利用核型分析可以检查染色体数目是否正常,并可发现较大染色体结构畸变以及判定性别等。
STR分型检测

仙台病毒残留检测
分化潜能检测
